稳定株构建

1、技术简介：

稳定细胞株构建，通常是将外源基因克隆到不同抗性的载体中，根据载体中所含有的不同抗性标志，来选用相应的药物对靶细胞进行筛选。和元生物最常用的抗性标记基因有潮霉素（hygromycin）、新霉素（neomycin）和嘌呤霉素（puromycin），一般常用Hygromycin B、G418和puromycin来进行选择性筛选。

利用慢病毒整合到宿主基因组的特性来筛选稳定株的方法克服了传统方法的弊端，可以在短时间内获得高效率的稳定细胞株。筛选得到的细胞或者可稳定表达目的蛋白，用于蛋白的扩增和富集；或者得到稳定沉默特定基因的细胞株。和元生物拥有包含440多株细胞的资源库，为稳转细胞株的构建提供了必要的资源条件。

2、技术及服务特点：

1）细胞使用种类广泛，可用于各种哺乳动物细胞；

2）稳定株构建时间短、表达持续时间长；

3）多种荧光标记和抗性基因可选，满足各类实验需求。

3、服务流程：

1）客户提供：目的细胞及信息、目的基因及信息、其他特殊要求；

2）实验过程：细胞复苏培养、细胞感染预实验、质粒构建与抽提、慢病毒包装与纯化、稳定株筛选及鉴定；

3）交付内容：目的基因稳定株及对照稳定株实验报告

4、实验案例图：

5、其他相关技术：

稳转细胞株筛选  敲除细胞株构建  靶基因验证  启动子活性验证  Pulldown  有效靶点筛选  

细胞凋亡检测  细胞增殖检测  细胞周期检测  细胞侵袭实验  细胞迁移/细胞划痕实验