慢病毒包装/慢病毒载体/Lentivirus

和元上海提供的慢病毒（Lentivirus）的生产和指控采取了国际学术界公认的标准流程，采用三质粒系统在293T细胞中进行包装。所获得的慢病毒颗粒经过超速离心纯化，并通过qPCR对慢病毒基因拷贝进行滴定。一般情况下我们生产的慢病毒滴度在10⁸-10⁹TU/ml，完全可以满足各类实验的使用要求。

慢病毒载体是一类改造自人免疫缺陷病毒(HIV)的病毒载体，基因组为RNA，对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。

慢病毒基因组进入细胞后，在细胞浆中反转录为DNA，形成DNA整合前复合体，进入细胞核后，DNA整合到细胞基因组中。整合后的DNA转录成mRNA，回到细胞浆中，表达目的蛋白；或产生小RNA。慢病毒介导的基因表达或小RNA干扰作用持续且稳定，并随细胞基因组的分裂而分裂（图1）。

慢病毒包装和感染过程

慢病毒与腺病毒、腺相关病毒、逆转录病毒载体相比，具有宿主范围广，免疫原性低，基因容量大，可以长期表达等特点。慢病毒包装主要用于难转染细胞的感染，稳转株的制备，神经系统的定位注射实验。难转染的细胞主要包括干细胞、免疫细胞（如DC细胞）、肿瘤细胞等，此外，慢病毒还可以感染仓鼠胚胎制备转基因动物。

慢病毒感染细胞时，由于细胞的来源、代数和细胞状态等因素的影响，MOI值在不同实验室也略有差异，下面我们提供公司部分细胞的慢病毒MOI感染参数，供实验参考（以下数据是细胞感染效率在80%细胞状态良好的情况下获得的）：

慢病毒的感染特点除了感染细胞类型广以外，慢病毒还具有体内外同时使用、表达起始时间短、基因容量比较大等特点，常用于神经、肿瘤、转基因动物制备等，目前也较为被广泛使用。